公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

LLC-PK1豬腎近曲小管上皮細(xì)胞 LLC-PK1 porcine kidney proximal tubular epithelial cells M199+3% FBS/DMEM+F12+12%FBS 大鼠血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)ELISA試劑盒 GH-RF(Human growth hormone relasing factor)  人生長(zhǎng)激素釋放因子 96T

MAGEA12： 黑色素瘤相關(guān)抗原12抗體 ICOSLG Others Mouse 小鼠 B7-H2 / CD275 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 大鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒 BACE2  大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2 96T

MAGEA2： 黑色素瘤相關(guān)抗原2抗體 KM小鼠子瘤株;U27

MDA-MB-468-06(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Y1(腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞) 大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒 Mouse c-fos  小鼠c-fos 96T

Phospho-Histone H3(Thr3)： 0酸化組蛋白H3抗體 F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA 試劑盒 Glu-Glu Tag peptide Glu-Glu Tag多肽蛋白 0.5mg

HPRT： 次0酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體 家豬皮膚細(xì)胞;SSC-S1 癌細(xì)胞，ZR-75-1細(xì)胞 NS1細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人(Coronaviruses IgG)ELISA 試劑盒 CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環(huán)核苷酸陽(yáng)離子通道蛋白α2抗原 0.5mg

Histone H3 (acetyl K9)： 乙酰化組蛋白H3抗體 CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HCC 38人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞IGFBP7 Others Human 人 IGFBP7 / IBP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒 cAMP  大鼠環(huán)0酸腺苷 96T

APRIN： 雄激素誘導(dǎo)增殖抑制蛋白抗體 CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

BT-549人管癌細(xì)胞 BT-549 human breast duct carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠干細(xì)胞因子(SCF)ELISA試劑盒 LP Ag(Human Legionella pneumophila antigen)  人軍團(tuán)菌抗原 96T

Phosphoserine： 0酸化絲酸抗體 MICB Others Human 人 MICB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK- 大鼠干細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF)ELISA試劑盒 Human colicin  人大腸菌素 96T